La Traición de Judas, que procede de la colección del duque de Pastrana, deriva de un original sobre tabla (47,5 x 40 cm), firmado, procedente de la colección del duque de Bouillon que, de acuerdo con Hofstede de Groot y Behermann, pasó luego a la colección Tronchin, donde figuró hasta 1928. Loche y Behermann recogen además, otro ejemplar sobre lienzo en la colección Eynard, en Ginebra (55,5 x 47.3 cm), que Loche considera también original, pero Behermann cataloga como copia. El tamaño original del lienzo del Museo del Prado, antes de ser trasladado a un nuevo bastidor, coincidiría con el del ejemplar de la colección Eynard. Podría ser también una copia de taller puesto que la reflectografía con infrarrojos no revela dibujo subyacente. Sobre la mesa figuran sólo siete monedas en lugar de las treinta que aparecen en el ejemplar de Ginebra.

La estructura compositiva, así como los diversos elementos iconográficos, parecen derivar de La escuela nocturna de Gerard Dou (Amsterdam. Rijkmuseum).

Ingresó en el Museo en 1889 con la donación de la duquesa viuda de Pastrana.